La tramvia entra in servizio alle 5 del mattino e finisce la sua corsa alle 00.30 della notte, mentre il venerdì ed il sabato il servizio si conclude alle 2 di notte. La frequenza delle corse varia a seconda di giorni e orari. Nelle ore di punta c'è una corsa ogni 5 minuti circa, e la frequenza varia soprattutto al mattino presto e fino ad un massimo di 18 minuti al sabato sera.
Sulla Linea Villa Costanza - Careggi la prima corsa, da lunedì al giovedì ed il sabato è prevista alle 05:39 mentre dalle 04.38 alle 05.30 le prime corse partono dalla fermata De André. La prima corsa del venerdì è alle 05:36 e dalle 04.35 alle 05.30 le prime corse partono dalla fermata De André. La prima corsa della domenica e nei festivi è alle 05:31, dalle 04.38 alle 05.30 le prime corse partono dalla fermata De André. L'ultima corsa da domenica a giovedì è alle 00:08 mentre l'ultima corsa del venerdì e sabato sera è alle 01:38
Nel percorso inverso da Careggi a Villa Costanza la prima corsa è alle 04:44. L'ultima corsa da lunedì al giovedì è alle 00:11, il venerdì e sabato alle 01:41 e la domenica alle 00:09.
Per la Linea T2 da piazza dell'Unità d'Italia all'Aeroporto Amerigo Vespucci la prima corsa è alle 05:00 mentre l'ultima corsa da domenica a giovedì è alle 00:30, il venerdì e sabato sera alle 02:00
Per il percorso inverso Aeroporto - Unità la prima corsa è alle 05.00 mentre l'ultima corsa da domenica a giovedì è alle 00:04 il venerdì e sabato sera alle 01:32